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本文標題："質粒DNA的提取-細菌分解的物質作碳源"
新聞來源：未知 發(fā)布時間：2017-1-19 15:49:37 本站主頁地址：http://m.f0211.cn
質粒DNA的提取-細菌分解的物質作碳源
降解性質粒，編碼一系列能降解復雜物質的酶，從而含該質粒的細
菌能利用一般細菌難以分解的物質作碳源。降解質粒以其所降解的底物
命名，例如降解樟腦的質粒(CAM)、降解萘的質粒(NAP)、降解甲苯的質
粒(TOE)和降解二甲苯的質粒(Ⅺm)等。
質粒DNA的提取是基因工程中基本技術之一，現已有多種成熟的方
案可供選擇。例如，利用堿性或煮沸條件下質粒DNA與染色體DNA變性和
復性的差異而進行分離。利用插入EB(溴乙錠)造成不同構型DNA，因而
沉降性質不同，通過CsCl梯度離心分離。利用羥基磷灰石在特定條件下
只吸附雙鏈DNA的羥基磷灰石法。利用高鹽及有SDS存在下大分子沉淀而
質粒分子保持在上清液中的高濃度NaCI法。利用加熱后變性與復性差異
而造成質粒存在于聚乙二醇相中，等等。往往是利用玻璃纖維膜(或硅
膠)吸附DNA，這時先利用堿性SDS裂解細胞，除去染色體，并在DNA復性
的高鹽條件下用膜吸附質粒DNA，然后用洗滌液洗去降解的RNA、蛋白質
等雜質，最后用TE或無菌水等低鹽條件洗脫得到質粒DNA。整個過程能
在lh之內完成。且提取的質粒DNA質量高，可直接用于酶切、連接、轉
化、標記、測序等操作。
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