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本文標題："線粒體、溶酶體和過氧化物酶體研究電子顯微鏡"
新聞來源：未知 發(fā)布時間：2016-12-27 13:58:29 本站主頁地址：http://m.f0211.cn
線粒體、溶酶體和過氧化物酶體研究電子顯微鏡
器材
除了微粒體的沉淀以外，所有的差速離心都能在冷凍高速離心機中
進行。為了將小顆粒對沉淀物的污染降到最小限度(見上文)，與吊桶式
轉子相比更推薦使用固定角轉子(管體積相同)，因為它們在凹液面和管
底之間的沉降路徑更小，離心力的差距也小[¨，16]。很明顯，轉子的
角度越小(對于垂直方向來說)，分離的效率越高，但是小角度的另一個
影響——沉淀趨于堆積得較松散，界限不明確，這是一個缺點。實際上
，大約30。的轉子是個折中的辦法。除了沉淀細胞核(第一步)這個唯一
的特例之外，都推薦使用固定角轉子；傾向于在這一步中使用吊桶式轉
子只是由于它常規(guī)地用于低速離心機(低速離心機主要匹配于這種轉子)
。此外，核與下一個最大的細胞器(線粒體)之間的沉降率差距如此之大
，以至于轉子的種類不再那么重要了。
密度梯度離心
現(xiàn)在廣泛認為，特別是對于一些可以在相對較低的離心力(1000g～
15000g)下沉淀的較大細胞器(細胞核、線粒體、溶酶體和過氧化物酶體
)來說，在吊桶式轉子長沉降路徑下以1000009以上的轉速，使用黏稠、
高滲的蔗糖梯度溶液，既不方便也對細胞器有潛在的傷害。因此，顯著
地趨向于使用低黏稠度梯度介質如Nycodenz@或碘克沙醇，這些梯度溶
液與蔗糖溶液(或甚至等滲的溶液)相比有更低的摩爾滲透壓濃度。盡管
傳統(tǒng)的吊桶式轉子仍然被廣泛地用于密度梯度離心，垂直或接近垂直轉
子的短沉降路徑不僅減少了離心時間，也將梯度溶液中強加于顆粒之上
相當大的流體靜壓的影響降到了最小。
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