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本文標(biāo)題："細胞質(zhì)量濃度的測定，細胞干重測定技術(shù)"
新聞來源：未知 發(fā)布時間：2016-12-21 0:32:20 本站主頁地址：http://m.f0211.cn
細胞質(zhì)量濃度的測定，細胞干重測定技術(shù)
測定細胞質(zhì)量濃度
直接法 對于細胞質(zhì)量濃度的測定，細胞干重測定是最常用的
直接法，并且僅能用于在不含固體顆粒的培養(yǎng)基中生長的細胞。如
果存在非細胞固體物(如糖蜜固體、纖維素或玉米漿)，那么干重測
量則不準(zhǔn)確。通常培養(yǎng)液的樣品要經(jīng)過離心或過濾，并用緩沖液或
水進行洗滌。洗后的濕細胞在80℃下干燥24h，然后測定細胞干重
。
填充細胞體積法用于發(fā)酵液中(例如工業(yè)抗生素發(fā)酵)細胞濃度
的快速粗略估計。在標(biāo)準(zhǔn)條件下(一定的轉(zhuǎn)速和時間)發(fā)酵液在錐形
刻度管中被離心，進而測量細胞體積。
另一種快速方法是基于樣品培養(yǎng)基中懸浮細胞對光的吸收。光
的強度用分光光度計測定。當(dāng)沒有其他固形物或吸光化合物存在時
，測量培養(yǎng)液的濁度或光密度是一種快速、廉價、簡單的細胞濃度
估計方法。樣品室中透光強度是細胞濃度和樣品室寬度的函數(shù)。光
的傳播由吸收和散射二者來調(diào)節(jié)。有顏色的細胞與無顏色的細胞結(jié)
果不同。必須考慮培養(yǎng)基中組分的本底吸收，特別是光吸收的溶解
物進入細胞時。培養(yǎng)基應(yīng)該基本上沒有顆粒。正確的程序需要：使
用培養(yǎng)基組分具有最小光吸收的波長(通常使用600 700nm)，和培
養(yǎng)基相對照的“空白”，以及使用校準(zhǔn)曲線。以光密度(0D)與干重
測量的關(guān)系作校準(zhǔn)曲線。校準(zhǔn)曲線在高OD值時(>0．3)可能呈非線
性，同時在某種程度上還與細胞的生理狀態(tài)有關(guān)。
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